Knudsonovo gojišče za orhideje

Knudsonov medij je umetni hranilni medij, ki ga je leta 1946 razvil ameriški botanik Lewis Knudson za kalitev semen orhidej in spodbujanje rasti v sterilnih pogojih. Je eden najpogosteje uporabljenih medijev za gojenje orhidej in vitro in je priljubljen tako za laboratorijsko kot domačo uporabo.

Kaj je knudsonov medij?

Orhideje naravno rastejo v simbiozi z mikoriznimi glivami, ki zagotavljajo esencialna hranila. Vendar pa je reprodukcija te simbioze v laboratorijskih pogojih nemogoča. Knudsonov medij je bil razvit kot nadomestek, bogat s hranili, ki zagotavlja vse bistvene elemente, potrebne za kalitev semen in rast sadik.

Sestava knudsonovega medija

Standardna formula vključuje:

• Sladkor: primarni vir energije.
• Mineralne soli:
  • Kalijev nitrat (kNO₃) – vir dušika.
  • Magnezijev sulfat (mgso₄) – zagotavlja magnezij in žveplo.
  • Kalijev dihidrogenfosfat (kh₂po₄) – zagotavlja fosfor in kalij.
  • Kalcijev klorid (cacl₂) – vir kalcija.
• Vitamini:
  • Nikotinska kislina, tiamin in piridoksin za aktiviranje presnovnih procesov.
  • Železo, cink, mangan in drugi elementi, bistveni za razvoj tkiv.
  • Agar-agar za ustvarjanje trdnega medija, ki preprečuje, da bi semena ali sadike pogreznile.
• Elementi v sledovih:
• Želirna sredstva:

Prednosti uporabe knudsonovega medija

1. Spodbuja kalitev semen:
   • Zagotavlja vsa potrebna hranila za kalitev in nadomešča potrebo po glivični simbiozi.
2. Sterilno okolje:
   • Ustvarja idealne pogoje za rast brez tveganja bakterijske ali glivne okužbe.
3. Optimalni pogoji rasti:
   • Podpira razvoj sadik, dokler niso pripravljene za presaditev v substrat.
4. Primerno za različne vrste orhidej:
   • Formulo je mogoče prilagoditi specifičnim potrebam različnih vrst orhidej.

Uporaba knudsonovega medija

1. Kalitev semen:
   • Semena orhidej so sterilizirana (običajno z raztopino natrijevega hipoklorita).
   • Sterilna semena se namestijo na površino hranilnega medija v petrijevkah ali epruvetah.
2. Rast sadik:
   • Substrat podpira razvoj sadik, dokler se ne pojavijo listi in začetni koreninski sistemi.
3. Presaditev v substrat:
   • Ko sadike dosežejo primerno velikost, jih presadimo v primeren substrat (npr. lubje, sfagnumov mah).

Kako pripraviti knudsonov medij?

Sestavine (primer za 1 liter):

• Agar-agar: 10 g
• Sladkor: 20 g
• Kh₂po₄: 250 mg
• MgSO₄·7h₂o: 250 mg
• Cacl₂·2h₂o: 250 mg
• Kno₃: 500 mg
• Vitamini (tiamin, nikotinska kislina): 1 mg vsak
• Mikroelementi (npr. feso₄): 1–2 mg
• Destilirana voda: 1 l

Koraki:

1. Vse sestavine raztopite v destilirani vodi.
2. Dodajte agar-agar in segrejte, da se popolnoma raztopi.
3. Raztopino nalijte v sterilne posode (petrijevke, epruvete).
4. Gojišče sterilizirajte v avtoklavu ali vodni kopeli (15 minut pri 121 °C).
5. Medij ohladite, da se strdi.

Nasveti za uporabo knudsonovega medija

1. Ohranite sterilnost:
   • Delajte v sterilnih pogojih, da preprečite kontaminacijo.
2. Spremljajte temperaturo:
   • Kulture hranite pri temperaturi +20–25 °C.
3. Zagotovite zadostno svetlobo:
   • Zagotovite mehko, razpršeno svetlobo 12–14 ur na dan.
4. Presajanje:
   • Sadike presadite v substrat, ko so dovolj velike za samostojno rast.

Zaključek

Knudsonov substrat je ključno orodje za uspešno kalitev semen orhidej in gojenje zdravih sadik. Zagotavlja popolno ravnovesje hranil za rast, s čimer odpravlja potrebo po glivični simbiozi. Ta substrat je idealen za razmnoževanje redkih in okrasnih vrst orhidej, bodisi v laboratoriju bodisi doma.